Resúmenes XL Reunión Anual, Pinamar Argentina- 2002(pág. 9 de 9)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 CERRAR

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METALOPROTEINASAS EN EL CAMBIO MORFOLOGICO DE LA MUCOSA INTESTINAL EN CELIACOS.
Verbeke S, Parducci R, Gotteland M, Cruchet S, Rios G, Brunser O.
Unidad de Gastroenterología, Instituto de Nutrición y Tecnología de los Alimentos (INTA), Universidad de Chile, Santiago, Chile.

En la enfermedad celíaca hay alteraciones de las proteínas de la membrana basal del epitelio del intestino delgado, observándose una disminución de colágeno IV, laminina y fibronectina; además hay desorganización de la a-actina de músculo liso. Estas proteínas y las metaloproteinasas (MMP) que las degradan son sintetizadas por los miofibroblastos (MF), estableciéndose un equilibrio síntesis-degradación en la matriz extracelular que contribuye a mantener la arquitectura normal de la mucosa. En la enfermedad celíaca los MF podrían estar involucrados directa, o indirectamente a través de sus productos, en la alteración de la mucosa intestinal en esta patología. No está claro si la disminución de las proteínas de la membrana basal se debe a una menor síntesis o a su degradación acelerada por las MMPs. Objetivo: El objetivo de este estudio fue evaluar la expresión de las MMP-1 y 3, y la actividad de MMP-2 en mucosa intestinal de controles normales y pacientes celíacos. Materiales y métodos: se cultivaron MF de mucosa intestinal de controles y pacientes celíacos y se obtuvieron los respectivos medios condicionados, con y sin estímulo por IFN-g, TNF-a, y/o péptidos de gliadina. Se evaluó en dichos medios la actividad de MMP-2 por zimografía; la expresión de MMP-1 y 3 se evaluó por inmunohistoquímica en cortes histológicos de mucosa intestinal de los mismos sujetos. Resultados: Se observó mayor actividad de MMP-2 en los celíacos que en los controles. TNF-a e INF-g estimularon, en forma dependiente de su concentración, la actividad de esta MMP. En la evaluación inmunohistoquímica de MMP-1 y 3 se observó una mayor intensidad de tinción en los celíacos en comparación con los controles principalmente en las criptas. Conclusión: la alteración de las moléculas de matriz y el cambio morfológico de la mucosa intestinal observados en los pacientes celíacos podría explicarse por una mayor actividad degradativa ejercida por las MMPs (Financiado por Fondecyt 1010578).

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METALLOPROTEINASES AND THE CHANGE OF THE SMALL INTESTINAL MUCOSA IN CELIAC DISEASE
Verbeke S, Parducci R, Gotteland M, Cruchet S, Rios G, Brunser O.
Gastroenterology Unit, Institute of Nutrition and Food Technology (INTA), University of Chile, Santiago, Chile.

In the small intestinal mucosa of patients with celiac disease there are alterations of some of the proteins of the basement membrane of the enterocytes: decrease of type IV collagen, laminin and fibronectin; in addition, smooth muscle a-actin distribution appears disorganized. These proteins and the metalloproteinases (MMPs) that degrade them are synthesized by subepithelial myofibroblasts (MF) and it is probable that there is an equilibrium between the processes of synthesis and degradation which contributes to maintain the normal mucosal architecture. MF may be involved, directly or indirectly , in the damage to the intestinal mucosa in celiac disease through changes in the activities of some of the molecules they synthesize. It is unknown whether the decrease of the basement membrane proteins is due to decreased synthesis or increased degradation of these proteins by MMPs. Aim: the aim of this study was the evaluation of the expression of MMPs 1 and 3, and the measurement of the activity of MMP-2 in the small intestinal mucosa of celiac patients and controls. Patients and methods: MF from the intestinal mucosa of patients and controls were cultured and the respective conditioned media with and without stimulation with IFN-g, TNF-a, and/or gliadin peptides were obtained. MMP-2 activity was measured by zymography; MMP 1 and 3 expression was assessed by immunohistochemistry in sections of intestinal mucosa from the same individuals. Results: MMP-2 activity was increased in celiac patients compared to the controls. TNF-a and INF-g stimulated in concentration-dependent form, the activity of this MMP. Immunohistochemical evaluation of MMP 1 and 3 showed increased staining, mainly around the crypts of celiac patients. Conclusions: The alterations of matrix molecules and the changes of the intestinal mucosa in the celiac patients may be due to increases in degradative activity of MMPs. (Supported by Fondecyt Project 101-0578).

 

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LOCALIZACION DE LA TRANSGLUTAMINASA TISULAR EN MUCOSA INTESTINAL DE PACIENTES CELIACOS.
Verbeke S, Rios G, Cruchet S, Gotteland M, Brunser O.
Unidad de Gastroenterología, Instituto de Nutrición y Tecnología de los Alimentos (INTA), Universidad de Chile, Santiago, Chile.

Los autoanticuerpos anti-reticulina y anti-endomisio, característicos de la enfermedad celíaca, están dirigidos contra proteínas no colágenas de la matriz extracelular sintetizadas por los miofibroblastos (MF) subepiteliales de la mucosa intestinal. La transglutaminasa tisular (tTG) ha sido identificada como el principal antígeno de los anticuerpos anti-endomisio. Por este motivo el objetivo es establecer la localización de la tTG y su relación con los MF en mucosa de pacientes celíacos al momento de diagnóstico y controles sanos. Pacientes y métodos: Se aplicaron técnicas de inmunohistoquímica e inmunomicroscopía electrónica a muestras de mucosa de intestino delgado obtenidas por biopsia en pacientes celíacos al momento de diagnóstico y controles sanos. Se utilizó un anticuerpo policlonal anti-tTG y segundos anticuerpos conjugados con FITC, peroxidasa o partículas de oro en los respectivas técnicas. Resultados y conclusiones: Mediante inmunohistoquímica se detectó tTG en la membrana basal de los enterocitos y alrededor de los MF. Por inmunomicroscopía electrónica, se observó expresión de tTG en las mitocondrias, en el retículo endoplásmico, en la zona de la membrana basolateral de los enterocitos y alrededor de la membrana plasmática de los MF. Ocasionalmente esta enzima estaba presente entre las microvellosidades del ribete estriado. Si bien la distribución de la tTG fue similar en los celíacos y controles, su densidad de expresión fue mayor en la mucosa de los pacientes celíacos. Estos resultados confirman la mayor actividad de la tTG en mucosa de pacientes celíacos respecto a controles sanos, reportada por otros autores (Fondecyt 1010578)


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LOCALIZATION OF TISSUE TRANSGLUTAMINASE IN INTESTINAL MUCOSA OF CELIAC PATIENTS.
Verbeke S, Rios G, Cruchet S, Gotteland M, Brunser O.
Gastroenterology Unit, Institute of Nutrition and Food Technology (INTA), University of Chile, Santiago, Chile.
The anti-reticulin and anti-endomisium autoantibodies characteristic of celiac disease are directed against non-collagen proteins of the extracellular matrix; these are synthesized in the intestinal mucosa by the subepithelial myofibroblasts (MF). Tissue transglutaminase (tTG) has been identified as the main antigen for anti-endomisium antibodies. For this reason the aim of this project was to locate tTG in the small intestinal mucosa and establish its relationships with mucosal MF in celiac patients at the time of diagnosis and in control individuals. Patients and methods: the study was carried out by immunohistochemistry and immunoelectron microscopy in biopsies of mucosa of celiac patients at the time of diagnosis and controls. A polyclonal antibody against tTG was used as first antibody and a second IgG antibody conjugated with FITC, peroxidase, or gold particles was used to reveal the location of the antigen-antibody reaction, as required by the different techniques. Results and conclusions: tTG was detected by immunochemistry in the basement membrane of the enterocytes and around subepithelial MF. Immunoelectron microscopy detected tTG in mitochondria, endoplasmic reticulum and the basolateral cell membrane of enterocytes, as well as around the cell membrane of MFs. The enzyme was also detected occasionally between the microvilli of the brush border. Although tTG distribution was similar in celiacs and controls, the label was more dense in the former. These results confirm the increase of tTG activity in the mucosa of celiac patients compared to healthy controls as had been by others authors (Fondecyt 101-0578)


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TIMO: POTENCIAL MARCADOR BIOLÓGICO DE DESÓRDENES NUTRICIONALES. ESTUDIO EN MODELO EXPERIMENTAL.
Pallaro A, Fernandez I, Feliú MS, Slobodianik NH.
Cátedra de Nutrición, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires.

Introducción: El tejido linfoide es severamente afectado por los desequilibrios nutricionales. Se ha observado que el timo, órgano de fundamental importancia en la inmunidad celular, se atrofia al extremo de manifestarse una verdadera timectomía nutricional. Por ello, se propone el estudio de este órgano como parte de la evaluación del estado nutricional. Objetivo: Estudiar el efecto de diversos desequilibrios nutricionales sobre el timo de ratas en crecimiento. Material y Métodos: Ratas Wistar al destete son divididas en tres grupos: grupo LP es alimentado con dieta carente en proteínas hasta pérdida del 25% del peso al destete, grupo Cas y M reciben durante 18 días dieta al 6.5% de proteína en base a caseína ó harina de maiz, respectivamente. Paralelamente se estudia un lote control normal alimentado con dieta stock para bioterio (Cargill). Al finalizar el período experimental, se sacrifican los animales previa anestesia y se les extrae el timo. Se determina peso del timo (PT, mg), recuento celular (RC, n° total de célulasx10-7/ml) en cámara de Neubauer, población celular T inmadura por inmunofluorescencia indirecta con anticuerpo monoclonal (% Thy1+), DNA (mg/órgano) y la actividad de la enzima purino nucleósido fosforilasa (PNP, mmolx10-1ácido úrico/PT/Peso corporal0.75). Se analiza la correlación estadística entre el peso del timo y los parámetros estudiados de los tres grupos experimentales en conjunto, utilizando el programa Microsoft Excel. Resultados: PT de todos los grupos experimentales se encuentra significativamente disminuido con respecto al control normal (LP:34.524.7, Cas:227.740.8, M:88.819.7 vs C:339.443.4, p<0.01).El coeficiente R2 hallado entre PT y RC es 0.95, entre PT y % Thy1+ es 1, entre PT y DNA es 0.99 y entre PT y PNP es 0.92. Discusión y Conclusión: Se corrobora la atrofia tímica que caracteriza los desequilibrios nutricionales y se demuestra la existencia de una alta correlación entre el peso del órgano y diferentes parámetros relacionados a la proliferación celular y funcionamiento del mismo. Estos hechos señalan al timo como un marcador biológico de los desórdenes nutricionales y están avalando la utilidad del estudio de modificaciones en el tamaño del timo en el niño malnutrido, como parte de la evaluación nutricional.

 

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THYMUS: POTENTIAL BIOMARKER OF NUTRITIONAL STATUS. STUDY IN AN EXPERIMENTAL MODEL.
Pallaro A, Fernandez I, Feliú MS, Slobodianik NH.
Department of Nutrition, School of Pharmacy and Biochemistry, University of Buenos Aires.

Introduction: protein energy malnutrition impairs host immunity and is particularly detrimental to lymphoid organs, like thymus, and T cells. It is observed thymus atrophy in malnourished children and a real thymectomy in severe cases. Objective: we study the effect of several nutritional disorders on thymus of growing rats in order to propose this organ as a biological marker of malnutrition states. Methods: Growing Wistar rats were divided into three groups: group PFD received a protein free diet until 25% lost of body weight, group Cas and M were fed during 18 days a diet containing 6.5% of casein or maize flour, respectively. A control group fed a commercial stock diet was run simultaneously (group C). At the end of the feeding period, animals were sacrificied and thymus was removed. Thymus weight (TW, mg), total number of cells (NC, cells x 10-7/ml), the percentage of immature thymocytes (%Thy1+), DNA (mg/organ) and the activity of purine nucleoside phosphorilase (PNP, mmolx10-1ácido úrico/PT/Peso corporal0.75) were determined. It was analysed the correlation between thymus weight and the studied parameters, using Excel Microsoft program. Results: TW of all experimental groups were significantly lower than C (PFD:34.524.7, Cas:227.740.8, M:88.819.7 vs C:339.443.4, p<0.01). R2 coefficient was 0.95 between TW and NC, 1 between TW and %Thy1+, 0.99 between TW and DNA and 0.92 between TW and PNP. Conclusions: data obtained confirmed thymus atrophy related to nutritional disorders and demonstrated a high correlation between thymus weight and cellular proliferation or organ function. These facts point out the thymus as a biological marker of nutritional disorders and suggest the utility of the study of thymus' size changes in the malnourished child as part on the nutritional evaluation.

 

 

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ANÁLISE DA IMUNOGENICIDADE DE UM SURFACTANTE DE ORIGEM PORCINA ADMINISTRADO EM COELHOS.
Precioso A1; Proença R1; Kubrusly F2; Gebara V2, Raw I2; Rebello C1.
1Departamento de Pediatria da FMUSP - Unidade de Pesquisa Experimental; 2Instituto Butantan, Brasil.

A introdução de proteínas heterólogas presentes no surfactante de origem porcina nas vias aéreas de recém-nascidos prematuros pode atuar como um estímulo imunogênico resultando em uma resposta imunológica a essas proteínas. Recentemente, o Instituto Butantan (Brasil) produziu um surfactante pulmonar de origem porcina composto principalmente de fosfolipídeos e de polipeptídeos hidrofóbicos, SP-B e SP-C. O objetivo deste estudo foi o de analisar a imunogenicidade do surfactante do Instituto Butantan em coelhos. Material e Métodos: 1) Surfactante pulmonar: o surfactante de origem porcina do Instituto Butantan (25mg de fosfolipídeos ml-1) foi obtido a partir de extração orgânica associada à adsorção em derivado de celulose. 2) Desenho do estudo: 16 coelhos adultos da raça New-Zealand-White foram divididos em 4 grupos: Grupo I-Survanta Abbott Laboratories (N=4), Grupo II-Curosurf Farmalab Chiesi (N=4), Grupo III- surfactante do Instituto Butantan (N=4) e Grupo IV-Sem surfactante (N=4). Os animais receberam 100mg/kg dos respectivos surfactantes via endotraqueal. Amostras sanguíneas dos coelhos foram obtidas imediatamente antes, 60 e 180 dias após a administração do surfactante. 3) Detecção de anticorpos anti-proteínas do surfactante pelo método de ELISA: kits de ELISA foram semeados com o surfactante produzido pelo Instituto Butantan e depois foram semeados com o sangue obtido dos coelhos dos 4 grupos de estudo. Um conjugado anti-coelho peroxidase foi usado como anticorpo secundário. Resultados: As médias das densidades ópticas dos testes ELISA realzados não foram estatisticamente diferentes entre os grupos analisados em todas as diluições avaliadas e também durante os três períodos de análise. Conclusão: A imunogenicidade do surfactante produzido pelo Instituto Butantan é semelhante à observada com o uso de outros surfactante disponíveis comercialmente (Survanta Abbott Laboratories e Curosurf Farmalab Chiesi).

 

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ANALYSIS OF THE IMMUNOGENICITY OF A PORCINE LUNG SURFACTANT PREPARATION ADMINISTERED IN RABBITS.
Precioso A1; Proença R1; Kubrusly F2; Gebara V2, Raw I2; Rebello C1.
1Departamento de Pediatria da FMUSP - Unidade de Pesquisa Experimental; 2Instituto Butantan, Brasil.

The introduction of the foreign proteins from animal lung-based surfactants into the aiway of premature infants may provide an antigenic stimulus with resultant immunological response to those proteins. Recently The Butantan Institute (Brazil) produced a porcine pulmonary surfactant preparation composed mainly of phospholipids with two hydrophobic polypeptides, SP-B and SP-C. The objective of this study was to analyse the immunogenicity of The Butantan Institute surfactant preparation in rabbits. Material and methods: 1) Lung surfactant: the pig lung surfactant preparation (25mg phospholipids ml-1) was obtained by organic extraction coupled with adsorption on a cellulose derivative. 2) Study design: 16 New-Zealand-White adult rabbits were divided into 4 groups. Group I-Survanta Abbott Laboratories (N=4), Group II-Curosurf Farmalab Chiesi (N=4), Group III- Butantan Institute surfactant (N=4), and Group IV-No surfactant (N=4). The animals in the treatment groups received 100mg/kg of respective surfactant administered intratracheally. Animals were bled immediately before, 60 and 180 days after surfactant administration.. 3) Detection of anti-surfactant antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA): ELISA plates were coated with Butantan Institute surfactan preparation and after the serum of the bleeding animals from de 4 groups were tested. An anti-rabbit peroxidase conjugate was used as the second antibody. Results: The average optical densities of the performed ELISAs were not statistically different among the groups at any serum dilution or at either bleeding time. Conclusion: The immunogenicity of the Institute Butantan surfactant preparation is similar to that observed with other surfactant preparations comercially available (Survanta Abbott Laboratories and Curosurf Farmalab Chiesi)

 

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COELHOS PREMATUROS EXPOSTOS À HIPEROXIA PROLONGADA: UM NOVO MODELO PARA O ESTUDO DA DISPLASIA BRONCOPULMONAR.
Proença RSM, Mataloun MMGB, Gibelli MACB, Okay Y, Vaz FAC, Mauad T, Rebello CM.
Unidade Pesquisa Experimental.Departamento de Pediatria,Universidade de São Paulo

Os modelos experimentais utilizados para o estudo da displasia broncopulmonar são caros e de difícil manipulação. Com o objetivo principal de desenvolver um modelo animal caracterizado pelo baixo custo e fácil manipulação induzido pela hiperoxia; coelhos prematuros de 28 dias foram randomizados em quatro grupos: ar ambiente por 7 dias (7Ar), oxigênio > 95% por 7 dias (7O2), ar ambiente por 11 dias (11Ar) e oxigênio > 95% por 11 dias (11O2). Peso pulmonar (PP), peso pulmonar específico (Ppe), relação peso pulmonar/peso corpóreo (PP/PC), volume pulmonar total (VPT), volume pulmonar total específico (VPTe), edema pumonar (% de água), espessura do septo alveolar, intecepto linear médio (Lm), área de superfície interna (ISA), número de alvéolos (RAC) e densidade de fibras elásticas e colágenas no interstício pulmonar foram avaliados após o sacrifício nos dias 7 e 11. Não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos quanto: PP, Ppe, PP/PC, VPT em ambos os períodos analisados. Um menor VPTe e uma menor porcentagem de água foi observada no grupo O2 11 dias. Um aumento do Lm e uma diminuição do número de alvéolos foram observados nos coelhos expostos ao oxigênio sacrificados com 7 dias e 11 dias. Uma maior densidade de fibras elásticas foi observada após 11 dias de exposição ao oxigênio e uma menor densidade de fibras colágenas nos expostos por 7 dias.

 
Edema (%H20)
Lm (mm)
ISA (cm2)
RAC
VPTe (ml/100g)
Elástica
Colágeno
7Ar
13,14±2,33
59,13±9,37
434 ± 211
3,51±0,81
8,10± 3,41
0,490±0,181
0,493 ± 0,125
7O2
12,01± 2,33
77,70±14,44§
408 ± 254
2,51±0,58§
7,97 ± 4,70
0,489 ± 0,285
0,354± 0,103
11Ar
14,81±2,89*
64,93±20,10
291 ± 149
4,50±1,62
5,06 ± 3,24

0,322±0,120**
0,478±0,170**
11O2
10,40±3,12*
88,38 ± 42,07§
283 ± 114
2,41±1,33§
4,44± 1,51*
0,721±0,297**
0,388±0,109**

* p < 0.05 vs todos os grupos; ** p < 0.05 vs 7 dias; § p < 0.05 vs Ar. Resultados em média ± desvio padrão.
Nós concluímos que 11 dias de exposição ao oxigênio em coelhos prematuros reproduz a maioria dos achados histopatológicos encontrados na DBP descrita em humanos.

 

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"PRETERM RABBITS SUBMITTED TO HYPEROXIA: AN ANIMAL MODEL FOR THE STUDY OF BRONCHOPULMONARY DYSPLASIA (BPD)."
Proença RSM, Mataloun MMGB, Gibelli MACB, Okay Y, Vaz FAC, Mauad T, Rebello CM.
Unidade Pesquisa Experimental.Departamento de Pediatria,Universidade de São Paulo

Experimental models used for the study of bronchopulmonary dysplasia (BPD) are expensive and difficult to manipulate. With the aim of developing an animal model characterized by low cost and easy manipulation induced by hyperoxia, 28 days preterm rabbits were randomized into four groups: room air for 7 days (7Air), oxygen > 95% for 7 days (7O2), room air for 11 days (11Air), oxygen > 95% for 11 days (11O2). Lung weight (LW), specific lung weight (SLW), lung weight/body weight ratio (LW/BW), total pulmonary volume (TPV), specific pulmonary volume (SPV), lung edema (water percentage), alveolar septal thickness, mean linear intercepts (MLI), internal gas-exchange surface area (ISA), alveoli number, and the elastic and colagen fiber density in the pulmonary intersticium were evaluated after sacrifice in day 7 and 11.
There were no statistic differences among the groups regarding to: LW, SLW, LW/BW, and TPV in both periods analyzed. A decreased SPV and a lower water percentage were observed in the O2 11 days group. An increased in MLI and a decreased alveoli number were observed in the hyperoxic rabbits sacrificed at 7 days and 11 days. A higher elastic fiber density was observed after 11 days oxygen exposure, and a lower colagen fiber density was observed after 7 days.

 
Edema (%H20)
Lm (mm)
ISA (cm2)
RAC
VPTe (ml/100g)
Elastic
Colagen
7Ar
13,14±2,33
59,13±9,37
434 ± 211
3,51±0,81
8,10± 3,41
0,490±0,181
0,493 ± 0,125
7O2
12,01± 2,33
77,70±14,44§
408 ± 254
2,51±0,58§
7,97 ± 4,70
0,489 ± 0,285
0,354± 0,103
11Ar
14,81±2,89*
64,93±20,10
291 ± 149
4,50±1,62
5,06 ± 3,24

0,322±0,120**
0,478±0,170**
11O2
10,40±3,12*
88,38 ± 42,07§
283 ± 114
2,41±1,33§
4,44± 1,51*
0,721±0,297**
0,388±0,109**

* p < 0.05 vs all other groups; ** p < 0.05 vs 7 days; § p < 0.05 vs Air. Results are mean ± sd.
We conclude that eleven days of oxygen exposure in preterm rabbits reproduce the major histopathologic findings of BPD described in humans.

 

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EFECTO DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO (HC) Y LA CASTRACIÓN (CA) SOBRE LA MADURACIÓN ÓSEA DE RATAS CON RETARDO PRENATAL DEL CRECIMIENTO (RPC).
Quintero F1,2, Guimarey L1, Orden B2,3, Fucini C4, Oyhenart E2,3
1Comisión de Investigaciones Científicas (CIC)- 2CIGEBA,3Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET)- 4 Facultad de Odontología/UNLP- Argentina

Objetivo: analizar el efecto de la HC y la CA sobre la maduración ósea en ratas con RPC. Material y Método: 204 crías de ratas Wistar se dividieron en los siguientes grupos experimentales: Control (C), Sham-operado (S), RPC, RPC+HC, RPC+CA y RPC+CA+HC. El RPC fue inducido por ligamiento parcial de las arterias uterinas a los 14 días de gestación. La HC fue administrada desde los 21 hasta los 60 días de edad (Genotropin® 3.0 mg/kg/día). En el grupo S se inyectó sólo el diluyente. La CA se realizó a los 21 días de edad. El espesor del cartílago tibial se evaluó longitudinalmente en Rx a los 1, 21, 42, 63 y 84 días de edad y se categorizó por niveles (N) siendo N1: Espesor máximo, N2: Reducción al 50% y N3: Ausencia. Se compararon las frecuencias porcentuales de cada N y se confeccionaron clusters de ligamiento simple en distancia euclidiana. Resultados: En las edades 1, 21 y 42 N1 fue de 100% en todos los grupos y en ambos sexos.. En machos, a los 63 días, la variación porcentual de N3 fue de 7% (C y RPC), 9% (RPC+CA), 18% (RPC+CA+HC) y 22% (RPC+HC). A los 84 días los grupos C, RPC y RPC+HC mostraron en promedio un 95.7% de N3. En cambio, en los grupos RPC+CA con y sin HC N3 fue de 74 y 59% respectivamente. En las hembras, a los 63 días el mayor porcentaje de N3 correspondió a RPC+HC (59%) seguido por RPC+CA (44%), RPC (36%), C (25%) y RPC+CA+HC (16%). A los 84 días N3 tuvo un promedio de 98.5% a excepción de RPC+CA (89%). El análisis de cluster a los 63 días indicó que el comportamiento más disímil lo tuvo RPC+CA, siendo similares C-RPC y RPC+HC- RPC+CA+HC. A los 84 días el grupo más disímil fue también RPC+CA, seguido por RPC+HC y RPC+CA+HC, siendo RPC y C los grupos más cercanos. Conclusiones: (a) El RPC, así como la administración de HC no afectan el ritmo de maduración ósea, (b) La castración retarda la maduración en ambos sexos y (c) La HC combinada con la castración, acelera el ritmo madurativo en machos y hembras RPC.

 

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EFFECT OF GROWTH HORMONE (GH) AND CASTRATION (CA) ON SKELETAL MATURATION IN INTRAUTERINE GROWTH RETARDED RATS (IUGR).
Quintero F1,2, Guimarey L1, Orden B2,3, Fucini C4, Oyhenart E2,3
1Comisión de Investigaciones Científicas (CIC)- 2CIGEBA,3Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET)- 4 Facultad de Odontología/UNLP- Argentina

Objective: to analyze the effects of GH and CA on skeletal maturation in IUGR rats. Material and Method: 204 Wistar pups were distributed into the following groups: Control (C), Sham-operated (S), IUGR, IUGR+GH, IUGR+CA y IUGR+CA+GH. IUGR was induced by partial uterine vessels ligation at 14th gestational day. GH treatment lasted from 21 to 60 days-of-age (Genotropin® 3.0 mg/kg/día). The group S was only injected with diluent. CA was made at 21 days-of-age. The tibial cartilage thickness was longitudinally measured on Rx at 1, 21, 42, 63 and 84 days old and categorized into the levels (L) L1: maximal thickness, L2: 50% of reduction and N3: absence. Percentual differences for each level were compared and clustered by simple ligation method (euclidian distance). Results: In all the groups, males and females, N1 was -on average- 100%. In males, at 63 days-of-age, the percentual variation of N3 was: 7% (C and IUGR), 9% (IUGR+CA), 18% (IUGR+CA+GH) and 22% (IUGR+GH). At 84 days-of-age the groups C, IUGR and IUGR+GH showed -on average- 95.7% of N3. At variance, in IUGR+CA, with and without GH, N3 was 74 and 59%, respectively. In females, at 63 days-of-age, the greatest percentage of N3 belonged to IUGR+GH (59%), followed by IUGR+CA (44%), IUGR (36%), C (25%), and IUGR+CA+GH (16%). At 84 days-of-age, N3 averaged 98.5%, except IUGR+CA (89%). The cluster analysis at age 63 indicated that IUGR+CA had the more dissimilar pattern, while C-IUGR and IUGR+GH- IUGR+CA+GH were more similar. At age 84 the more dissimilar was also IUGR+CA, followed by IUGR+GH and IUGR+CA+GH, being closer IUGR and C. Conclusions: (a) IUGR as well as GH administration does not affect the maturation rate, (b) Castration retard skeletal maturation in both sexes, and (c) GH combined with castration, accelerate maturation rate in IUGR males and females.

 

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COMPARACIÓN DE MÉTODOS RÁPIDOS DE MEDICIÓN DE GLUCOSA SANGUÍNEA EN RECIÉN NACIDOS DEL HOSPITAL REBAGLIATI
Chirinos J, Burga C, Maldonado M, Chung, S Gamarra I, Morales L.
Servicio de Neonatología - Hospital Nac. E. Rebagliati M. - EsSALUD - Lima - Perú

Objetivos: (1)-Determinar si los glucómetros en neonatos se correlacionan con el patrón de oro, cuál es más exacto y con menos interferencias. (2)-Determinar sensibilidad, especificidad y valores predictivos de esos glucómetros. (3)-Determinar si el sistema de toma, envío, procesamiento y reporte de muestras del servicio a laboratorio es el adecuado. Se compararon 2 métodos de glucometría, amperometría (Precision QID®) y fotometría (Glucotrend Plusâ) con el patrón oro (glucosa hexoquinasa de laboratorio) en 320 neonatos del Rebagliati. En muestras simultáneas se determinó glicemia, hematocrito, tiempo de envío y de procesamiento de la muestra, si el neonato estaba ictérico, pálido o rubicundo, índice de correlación, sensibilidad, especificidad, valores predictivo positivo y negativo, promedios, desviaciones estándar, intervalos de confianza y rectas de correlación. Fueron evaluados según estándares de la FDA-CDRH (USA).
Sensibilidad, Especificidad, Valor Predictivo y Negativo de Precision QIDâ y Glucotrend Plusâ, según valores límites de euglicemia (45mg/dL>normoglicemia<120mg/dL) (n=320)

  Precision QID Glucotrend Plus
Sensibilidad 69,84% 57,14%
Especificidad 97,28% 96,89%
Valor Predictivo Positivo 86,27% 81,82%
Valor Predictivo Negativo 92,94% 90,22%

Comparación cuantitativa de los Glucómetros con el Patrón de Oro (Normo, Hipo e Hiperglicemia. n = 320) (Sólo Hipoglicemia n = 47)

Factor
Precision QIDâ
Patrón Oro
Glucotrend Plusâ
Corr. Pearson (n=320)
0,932
1
0,892
R2 (n=320)
0,87
1
0,80
Corr. Pearson (n=47)
0,572
1
0,480
R2 (n=47)
0,327
1
0,231

Conclusiones y Recomendaciones: No se deben usar los glucómetros para tamizaje de hipoglicemia neonatal. Se recomienda diseñar glucómetros específicos para neonatos, con mejor precisión para valores bajos, el uso de tubos de fluoruro de sodio/potasio y usar los estándares FDA-CDRH para adquirir glucómetros por instituciones de salud. El hospital Rebagliati debe cambiar su sistema de muestreo y envío para glicemia sérica urgentemente.

126
COMPARISON OF TWO METHODS OF RAPID BLOOD GLUCOSE METERS IN NEWBORNS OF REBAGLIATI HOSPITAL
Chirinos J, Burga C, Maldonado M, Chung, S Gamarra I, Morales L.
- Neonatal Unit - Rebagliati Nat. Hospital - EsSALUD - Lima - Peru

Objectives: (1)-To establish if the glucometers in newborns are correlated with gold standard, which is more exact and with less interferences. (2)-To establish sensibility, specificity and predictive values of those glucometers. (3)-To establish if the sampling system, shipment, prosecution and report of samples from Neonatal Unit to Laboratory are the appropriate ones. 2 methods were compared, amperometric (Precisión QID®) and photometric (Glucotrend Plus®) with the gold standard (laboratory glucose hexoquinase) in 320 newborns from Rebagliati Hospital. In simultaneous samples was determined glycemia, hematocrit, time of samples' shipment and prosecution, if the newborn was jaundiced, pale or reddish, correlation index, sensibility, specificity, predictive positive and negative values, averages, standard deviations, confidence intervals and linear correlation. They were evaluated according to FDA-CDRH standards (USA).
Sensitivity, Specificity, Positive and Negative Predictive Values of Precision QIDâ and Glucotrend Plusâ, normoglycemia (45mg/dL>normal<120mg/dL) (n=320)

 
Precision QID®
Glucotrend Plus®
Sensitivity 69,84% 57,14%
Specificity 97,28% 96,89%
Positive Predictive Value 86,27% 81,82%
Negative Predictive Value 92,94% 90,22%


Cuantitative Comparation of Glucometers with Gold Standard (Normo, Hypo e Hyperglycemia. n = 320) (Only Hypoglycemia n = 47)

Factor
Precision QIDâ
Gold Standard
Glucotrend Plusâ
Corr. Pearson (n=320)
0,932
1
0,892
R2 (n=320)
0,87
1
0,80
Corr. Pearson (n=47)
0,572
1
0,480
R2 (n=47)
0,327
1
0,231

Conclusiones y Recomendaciones: No se deben usar los glucómetros para tamizaje de hipoglicemia neonatal. Se recomienda diseñar glucómetros específicos para neonatos, con mejor precisión para valores bajos, el uso de tubos de fluoruro de sodio/potasio y usar los estándares FDA-CDRH para adquirir glucómetros por instituciones de salud. El hospital Rebagliati debe cambiar su sistema de muestreo y envío para glicemia sérica urgentemente.

127
GLUCOGENOSIS I .FACTORES ASOCIADOS A SU EVOLUCION.
Eiroa H, Araujo M, Bay L.
Servicio de Nutrición. Hospital Nacional de Pediatría J.P. Garrahan. Ciudad de Buenos Aires Argentina

En glucogenosis I(GsdI), el tratamiento médico es efectivo, sin embargo algunos pacientes tienen evolución desfavorable.
Objetivo: identificar los factores asociados a mala evolución. Materiales y métodos: se analizaron datos de todos los pacientes que fueron atendidos en el Hospital con diagnostico de glucogenosis tipo I. (n: 33). Se consideraron parámetros para definir buena evolución, crecimiento adecuado (scoreZ de talla entre -2 DS y +2DS) , maduración y nivel intelectual normal (evaluado por escolaridad), ausencia de adenomas hepáticos y supervivencia . Los pacientes que desertaron del seguimiento después del diagnóstico(n:6) se excluyeron en el análisis. Se comparan scoreZ de talla(sZ), y datos de laboratorio de los dos grupos. Se correlaciona sZ de talla con valores de ácido láctico, ácido úrico y colesterol (Correlación Pearson). Se relaciona (test T y test exacto de Fisher) la evolución con: el tipo de glucogenosis (Ib vs Ia), la edad de diagnóstico, los antecedentes familiares, dieta con o sin fructosa y lactosa y condición socioeconómica.
Resultados: El diagnóstico se hizo a los 0.58±0.4 años (rango 0.1-1.1 años ). Cinco casos eran glucogenosis Ib (neutropenia periódica en su presentación o en la evolución). El sZ de talla luego de 60±26 meses de seguimiento fue de -0.5±1.05 en los de buena evolución (BE)(n:16) y de -2.07±1.67 en los otros (ME)(n:11). El colesterol en BE fue de 175 ±31mg% y en ME 210±86 mg% (diferencia no significativa) el ácido úrico BE: 5.22±1.19mg% y ME: 7.7±2.15mg% (p<0.009); ácido láctico BE: 45.28±11.57mg% y ME: 60.5±13.35mg% (p< 0.01). La correlación de sz de talla con ácido láctico fue: r = -0.77. La edad del diagnóstico, la presencia de antecedentes familiares y si fueron derivados o no, no diferenciaron la evolución. El 100% de los GdsIb y de los que recibieron dieta con fructosa y lactosa, tuvieron mala evolución. La mala condición socioeconómica se asoció a mala evolución (p0.016). Conclusión: El sZ de talla en la evolución tiene correlación con el promedio de valores de ácido láctico de -0.77. Definida clínicamente la evolución de los pacientes con glucogenosis I se encontró que tener tipo IB de la enfermedad, recibir fructosa y lactosa en la alimentación y malas condiciones sociales se asociaron a mala evolución.

 

127
GLYCOGEN STORAGE DISEASE TYPE I. OUTCOME ASSOCIATED VARIABLES.
Eiroa H., Araujo M., Bay L.
Servicio de Nutrición. Hospital Nacional de Pediatría J.P. Garrahan. Ciudad de Buenos Aires Argentina

Medical treatment is effective to achieve a favorable outcome in glycogen storage disease type I (GsdI), however many patients do not achieve it.
Objective: to identify associated factors to an unfavorable outcome. Patients and Methods: All patients with GsdI diagnosed at our center were included (n: 33). To consider favorable outcome, the following variables were analyzed: appropriated growth (height scoreZ between -2 DS y +2DS), normal maturation and intellectual level (evaluated through scholarship), absence of hepatic adenomas and survival. Six (n: 6) patients were excluded because of desertion after their were diagnosed. Height scoreZ (sZ), and the biochemical variables (cholesterol, uric acid and lactic acid) were compared between the two groups (favorable outcome (FO) and unfavorable outcome (UO)). Height sZ was correlated with values of biochemical variables (Pearson Correlation). Outcome was related to (test T and Fisher's exact test) subtype of gsdI (Ib vs Ia), age at diagnose moment, familiar background; diet with or without fructose and lactose and socioeconomic status.
Results: The patients were diagnosed at 0.58±0.4 years (range 0.1-1.1 years). Five were GsdIb (periodic neutropenia). Height sZ after 60±26 months follow up were: -0.5±1.05 for the FO group (n: 16) and -2.07±1.67 for the UO group (n: 11). Cholesterol for FO group was 175 ±31mg%; For the UO group 210±86 mg% (not statistical difference). Uric acid for FO group was 5.22±1.19mg%; For the UO group 7.7±2.15mg% (p<0.009). Lactic acid for FO group was 45.28±11.57mg%; For the UO group 60.5±13.35mg% (p< 0.01). Height sZ correlation to lactic acid was: r = -0.77. Age at diagnose moment, familiar background and if their were derived from other centers or not, showed no difference for outcome categories. All GdsIb and all who received diet with fructose and lactose, were in the UO group. Low socioeconomic status was associated to an unfavorable outcome (UO ) (p0.016). Conclusion: Height sZ was correlated to lactic acid values (r=-0.77). Clinically defined the GsdI outcome, it was found that to have a subtype Ib of the disease, to receive fructose and lactose from dietary source and to have low socioeconomic status was associated to a unfavorable outcome (UO).

 
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