ABSTRACT USHUAIA (pág. 1 de 6)

1 PREVENCIÓN DE MEMBRANA HIALINA EN EMBARAZO GEMELAR

Pérez, M; Salinas R; Torres J; Grupo Colaborativo Geminis. CIP Centro de Investigación Perinatal (CIP). Facultad de Medicina U.de Chile

El efecto beneficioso de los corticoides prenatales en relación con el riesgo de membrana hialina esta ampliamente demostrado. Sin embargo, las referencias actuales sugieren que este efecto no sería semejante en los recién nacidos de embarazos gemelares, expuestos a una interrupción prematura de la gestación. El objetivo del estudio fue evaluar si la administración de corticoide prenatal a la dosis descrita por Liggins es capaz de prevenir la membrana hialina en el embarazo gemelar.
Material y Método: Se realizó un estudio multicentrico, de cohortes en 13 centro que incluyó embarazos gemelares dobles con edad gestacional entre 25 y 34 semanas. Se excluyeron patologías del embarazo que pudieran alterar la madurez pulmonar. El grupo (a) lo formaron 47 embarazos gemelares que recibieron la dosis óptima de corticoide prenatal: betametasona acetato fosfato 12 mg IM cada 24h , 2 dosis, con intervalo de nacimiento entre 24h y 7 días desde la última dosis, independientemente del números de ciclos repetidos cuando fue necesario. El grupo (b) lo formaron 50 embarazos gemelares que no recibieron corticoides. No hubo ningún otro tipo de intervención durante el estudio. El tamaño muestral fue de 91 niños por grupo; ingresaron 94 en el grupo (a) y 100 en el grupo (b). No hubo diferencias entre los grupos en relación a las características maternas: edad materna, edad gestacional, patología del embarazo ni en las características neonatales: vía del parto, peso de nacimiento, sexo y Apgar.

Conclusiones: El uso prenatal de corticoides en el embarazo gemelar, a las dosis usadas por Liggins, no reduce la incidencia de membrana hialina, letalidad, IPPV ni uso de surfactante. Es posible que la edad gestacional del grupo estudiado (32 semanas) o quizás la dosis o el número de dosis de corticoide hayan sido insuficientes para inducir maduración pulmonar en gemelares. Se requieren estudios clínicos controlados para dilucidar estos aspectos.

PREVENT RESPIRATORY DISTRESS SYNDROME IN TWIN PREGNANCY

Pérez, M.; Salinas, R.; Torres, J.; Collavorative Group Geminis. CIP

The beneficial effect of the antenatal steroids in relation to the respiratory distress syndrome (RDS) risk has been  demonstrated widely. However, the current references suggest that this not serious effect similar in the premature of twin pregnancies, who are exposed to a premature interruption of pregnancy. The objective of the study was to evaluate if the administration of antenatal corticosteroids with the doses described by Liggins are capable of preventing RDS in the twin pregnancy. Material and Method: It was an accomplished multicentric study, of cohorts in 13 centers that included double twin pregnancies with gestacional age between 25 to 34 weeks. They were excluded pathologies of the pregnancy that could alter the pulmonary maturity. Group (a) formed by 47 twin pregnancies received optimal course of antenatal corticosteroids: 12 mg IM betamethasone acetate phosphate 2 doses, 24 hours apart, with delivery ocurring  between 24h and 7 days after the last dose, independently from the numbers of repeated cycles when it would be necessary. Group (b) formed by 50 twin pregnancies  with no antenatal corticosteroids. There was no another   intervention during the study. The sample size was 91 infants per group: in this trial admitted 94 newborn in group (a) and 100 in group (b). There were no differences between the groups in relation to maternal characteristics: maternal  age, gestational age, pathology of pregnancy neither neonatal characteristics: mode of delivery, birthweight, sex and Apgar score.

Conclusions The use of antenatal corticosteroids in twin pregnancy, at the doses used by Liggins,  does not reduce the incidence of respiratory distress syndrome, lethality, IPPV, neither the use of surfactant. It is possible that the gestacional age of the studied group (32 weeks) or dose or the number of doses of corticosteroids may have been insufficient to induce lung maturity in twins. These results remark the need of controlled clinical trials in order to answer these questions.

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CONTEO DE CUERPOS LAMELARES EN LIQUIDO AMNIÓTICO: EVALUACIÓN DE UN TEST RAPIDO PARA LA PREDICCION DE LA MADUREZ PULMONAR FETAL.

Perego M.; Briozzo G; Durante C  y Grandi C. Hospital Materno-Infantil “Ramón Sardá”. Buenos Aires , Argentina.

El manejo y pronóstico perinatal de los embarazos de alto riesgo se basa principalmente en la                estimación certera de la madurez pulmonar fetal.

Objetivos: 1)  evaluar la capacidad operativa del CCL en Líquido Amniótico (LA) como predictor de la madurez pulmonar fetal, y 2) estimar la concordancia entre el Conteo de Cuerpos Lamelares (CCL) en LA  y el Test de Clements.  
Material y métodos: El estudio incluyó 111  muestras de LA de embarazadas entre 30 y 42 semanas (media 36.1 semanas, DS 3.7) de edad gestacional .Se realizaron los 4 tests que el Laboratorio de la Maternidad Sardá efectúa rutinariamente para evaluar maduración pulmonía fetal: Test de Clements, Test de Freer (Ft50),  FSI (Foam Stability Index)  y Lectura Espectrofotométrica a 600 nm. Previa centrifugación a cada muestra se le efectuó el CCL por triplicado en contador electrónico de partículas Coulter JT en el canal correspondiente a las plaquetas. Se excluyeron las muestras con mucus, meconio o sangre.
Resultados: Mediante la curva ROC se fijó un CCL > 25.000 como punto de corte ( p <  0.001) .  Prevalencia del Clements Positivo: 53.1%,  Falsos Positivos: 11.5%,  Falsos Negativos: 8.47%,  Sensibilidad: 91.5%, Especificidad: 88.4%, Valor Predictivo de la Prueba Positiva: 90%, Valor Predictivo de la Prueba Negativa: 90.2%, Eficiencia de la Prueba: 90.1%, Razón de Verosimilitud (LR)  Positiva: 7.95, Razón de Verosimilitud (LR) Negativa: 0.09, Error Pronóstico Positivo: 11.5% y Error Pronóstico Negativo: 9.8%. El CCL contrastado con los tests biofísicos para  estimar madurez pulmonar demostró un moderado grado de correlación (r: 0.67,  R² : 45.3%,  p < 0.001 )  y  una  elevada concordancia ( Indice Kappa: 0.80,   p < 0.001 ).  
Conclusiones: hemos incluído este test para evaluar la madurez pulmonar por su elevada capacidad operativa (esto obviaría el uso del Indice L/E  Lecitina/ Esfingomielina  por cromatografía),  pero siempre acompañado del perfil tradicional. Además de ser un test rápido y de bajo costo, requiere un pequeño volumen de muestra del LA y un instrumental accesible a la mayoría de los laboratorios.

LAMELLAR BODY COUNTS (LBC) IN AMNIOTIC FLUID: EVALUATION AS A RAPID  TEST FOR THE PREDICTION OF FETAL LUNG MATURITY.

Perego M.; Briozzo G; Durante C  y Grandi C. Hospital Materno-Infantil “Ramón Sardá”. Buenos Aires , Argentina.

Perinatal   outcomes and guidelines for the management of high-risk pregnancies are mainly based on the sure assessment of fetal lung maturity.

Objectives: 1) to estimate the ability  of  LBC  in AF as a predictor of fetal lung maturity and 2) to evaluate the  agreement between Amniotic Fluid LBC and  Clement’ test.  
Materials and methods:  111 AF samples from pregnant women  between 30 and 42 gestational weeks (mean +  SD : 36.1 + 3.7) were included. Four tests that the Laboratory runs routinely to predict fetal lung maturity were performed: Clement’s test, Freer’ s  test, Foam Stability Index and Photometric Absorbance at 600 nm.  Additionally a LBC  on a Coulter JT for electronic platelet count was performed three times on each sample, excluding those containing mucus, meconium or blood. 
Results: The following Diagnostic Indexes were computed using a cutoff of a LBC >  25000   (p < 0.001) by mean of ROC  curve: Prevalence of Positive Clements 53.1%, False Positives 11.5%, False Negatives 8.47%, Sensitivity 91.5%, Specificity 88.4%, Positive predictive value 90%, Negative predictive value 90.2%, Efficiency 90.1%,  Positive and Negative Likelihood Ratios 7.95 and 0.09 respectively. LBC as compared with the lung maturity biophysical tests showed a moderate correlation (r = 0.67, p< 0.001; R² = 45.3%) but a high agreement  (Kappa Index: 0.80, p < 0.001). Conclusions: because its quite a good performance we’ve included  LBC test along with the other  parameters for the prediction of  lung maturity  (this fact would make unnecessary the use of L/E cromatography). Besides, it is rapid, low-cost test that requires a small sample volume and instrumental accessible to almost all laboratories.

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USO DE CURVAS DE SOBREVIDA ACTUARIAL EN LA ATENCION DE PREMATUROS CON PESO AL NACER MENOR DE 1500 g.

Fustiñana C, Rodríguez D, La Mura G, Ceriani Cernadas JM. División Neonatología. Departamento de Pediatría. Hospital Italiano de Buenos Aires. Buenos Aires. Argentina

Introducción y objetivo: Dado  que la mortalidad neonatal desde el ingreso al alta no provee información de expectativa de vida en prematuros de muy bajo peso al nacer (PTMBPN) y que el uso del análisis de sobrevida actuarial ha demostrado su utilidad en el manejo de pacientes con cancer, hemos utilizado la metodología descripta por Cooper y Col. en una población de RNMBPN. Para ello caracterizamos la sobrevida actuarial como la expectativa de vida a cada edad postnatal, en una población de PTMBPN nacidos en la Maternidad de nuestro hospital.
Métodos: Determinamos la sobrevida actuarial en una muestra de 192 RNMBPN (entre 23 y 32 semanas de edad gestacional) admitidos entre enero de 1994 y diciembre de 1997 en la UCIN. Los pacientes fueron estratificados en intervalos de peso de 250 gramos y de 1 semana de edad gestacional. No fueron excluidos los RN con malformaciones mayores.
Resultados: En el intervalo entre 500 y 750 gramos la sobrevida actuarial se incrementó desde 35 % al nacer a 72 % a la semana de vida y 95% en el día 30. En el intervalo de 1000 a 1250g se observó un una sobrevida de 85% al nacer que se incrementaba a 98% a la semana de vida. Tendencias similares se observan cuando se estratifica por edad gestacional.
Conclusión: La sobrevida de los PTMBPN presenta un incremento significativo en la primer semana de vida y este efecto es mas marcado a medida que disminuye el peso de nacimiento y la edad gestacional, sin embargo existen muertes tardías en todos los grupos.

ACTUARIAL SURVIVAL AND CARE OF PRETERM INFANTS BELOW 1500 g.

Fustiñana C, Rodríguez D, La Mura G, Ceriani Cernadas JM. División Neonatología. Departamento de Pediatría. Hospital Italiano de Buenos Aires. Buenos Aires. Argentina. (Email: cfusti@hitalba.edu.ar)

Objective. Survival data do not provide information about life expectancy in the premature neonate, The actuarial survival defined as future expectancy of life from a given postnatal age has showed be usefull for physicians and parents in Cooper´s  study. We characterized the actuarial survival in an inborn population of very low birth weight infants (VLBWI).
Methods: We determined daily actuarial survival in 192 premature babies with a birth weight < 1500 grams admitted to the NICU of the Hospital Italiano between january 1994 and december 1997. The sample was stratified by  250 grams and 1 week of gestational age intervals.
Results: In the 500-750 grams birth weight stratum actuarial survival improved from 35 % at birth to 72 % on first week and then to 95 % at 30 days. In the 1000 to 1250 grams stratum, the actuarial survival improved from 85 % to 98% from 7^th day to 30^th day. The same trends were obtained when data were stratified by gestational age.
Conclusions: Survival in VLBWI, clearly improved in the first week of life and this fact is more dramatic in the smallest birth weight  and gestational age stratum. However there is still a risk for a late death in all groups.

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CRECIMIENTO POSTNATAL EN PREMATUROS HOSPITALIZADOS CON PESO AL NACER MENOR DE 1500 g. ¿ES ADECUADO EL ESTANDAR DEL NICHD?

Fustiñana C, Rodríguez D, La Mura G, Ceriani Cernadas JM. División Neonatología. Departamento de Pediatría. Hospital Italiano de Buenos Aires. Buenos Aires. Argentina.

Introducción y objetivo:  En 1999 fue publicada la referencia de crecimiento del NICHD para preterminos de muy bajo peso al nacer (PTMBPN) en reemplazo de la curva de Dancis (1948), la necesidad de dicha actualización se basó en los cambios producidos en las últimas décadas en el cuidado integral de los PTMBPN. El presente estudio se realizó para determinar la adecuación de dichas curvas para el uso en poblaciones de PTMBPN  de nuestro medio.
Métodos: Se evaluó prospectivamente el crecimiento físico en 102 pretérminos con peso al nacer entre 500 y 1500 gramos admitidos en la UCIN desde enero de 1994 hasta diciembre de 1998 y que sobrevivieron más allá de la pimera semana de vida; libres de malformaciones congénitas mayores. Se tomaron mediciones antropométricas seriadas (peso, longitud y perímetro cefálico) desde el nacimiento hasta el alta, fallecimiento, traslado, edad de 4 meses o cuando el peso alcanzó los 2000 gramos
Resultados: Se construyeron las curvas correspondientes a cada intervalo de 100 gramos de peso de nacimiento observándose que las curvas obtenidas tenían un ajuste cuadrático similar a las del NICHD. Se observó diferencia de crecimiento entre los pacientes con baja y alta morbilidad y/o retardo del crecimiento intrauterino y el resto de la población cuando se compararon las ganancias de peso luego de recuperar el peso de nacimiento: 16 g/kg/d vs. 11 g/kg/d (p<0,05)
Conclusión: Las curvas del NICHD muestran un ajuste que pudo ser replicado en nuestra población con un comportamiento distinto de acuerdo al estado clínico del neonato. Consideramos que un estudio multicéntrico sería necesario para confirmar nuestros hallazgos

POSTNATAL GROWTH OF HOSPITALIZED VERY LOW BIRTH WEIGHT INFANTS. IS THE NICH STANDARD APPROPIATED?

Fustiñana C, Rodríguez D, La Mura G, Ceriani Cernadas JM. División Neonatología. Departamento de Pediatría. Hospital Italiano de Buenos Aires. Buenos Aires. Argentina. (Email: cfusti@hitalba.edu.ar)

Objective. The posnatal growth curves for VLBWI from NICHD (Pediatrics 1999;104:280), Because the grotwh rates for VLBWI exceeded those predicted by the Dancis curves (1948). The aim of the present study is to assess the NICHD curves compeared with a local sample of VLBWI.
Patients and methods: Growth was prospectively assessed for 102 infants with birth weight between 500 to 1500 grams admited in the NICU of the Hospital Italiano between January 1994 and December of 1998. Infants were included if survived at 7 days of life, and were free of major congenital anomalies. Anthropometric measures (body weight, lenght and head circunference) were performed from birth until discharge, transfer, death, age 4 months, or a weight of 2000 grams.
Results: Postnatal growth curves were constructed by intervals of 100 grams of birth weight and the family of obtained curves show a cuadratic fit ,similar to the NICHD standard. We also find significatives differences in weight gain between appropriated-for gestational age infants without major morbidities than comparable infants with BPD, necrotizing enterocolitis,  severe intraventricular hemorrage, etc: 16 g/kg/d vs. 11 g/kg/d (p<0.05).
Conclusions: Our sample shows a similar fit to the NICHD curves and we also find differences according to infant morbidity. We considered that a multicenter study is necessary to confirm our results.

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EL TRANSPLANTE DE MEDULA OSEA (TMO) EN EL SINDROME DE HUNTER (SH).

Chamoles N. Fundación para el Estudio de las Enfermedades Neurometabólicas (FESEN).

En los pocos casos con SH en que se realizaron TMO se observaron mejorías variables.
Presentamos el análisis de los resultados del TMO en 4 casos de síndrome de SH. 

             PACIENTES                  1                       2                     3                       4

       Edad diagnóstica        2 años                1mes             20 días           2 7/12 años

       Mutación                   1246C>T         1246C>T         S132W      Inversión del GIDS

       Edad TMO             7 10/12 años          3 años           3 años               3 años

       Seguimiento            1 3/12 años       111/12 años      8 años             2 ½ años

Los enfermos con TMO normalizaron los glicosaminoglicanos urinarios primero, y la actividad enzimática (suero y leucocitos)  luego. En los 3 casos estudiados después 1 ½ año del TMO no se encontró ADN mutante en sangre (nivel de detección del método: hasta 1 %).
Todos los casos mostraron mejoría de las anormalidades somáticas: disminución del tamaño del hígado, disminución o desaparición de las rigideces articulares y de las infecciones respiratorias.  
La ausencia de compromiso del SNC de los casos 1 y 2 se relacionaría más con la evolución natural de la enfermedad en esa familia (mutación leve del gen de la iduronato sulfatasa), que con el TMO.
El  caso no transplantado de esta familia murió a los 18 años, sin evidencia de deterioro intelectual.
El caso 3 (hermano de un enfermo con una forma severa de MPS II) era mentalmente normal cuando recibió el TMO. A pesar de la buena evolución del mismo, con ausencia de rechazo del injerto por el huésped, niveles enzimáticos normales,  y mejoría física, el paciente mostró un progresivo deterioro de sus funciones neurológicas e intelectuales. El TMO no evitó el compromiso del SNC. Este mismo comentario es aplicable al caso 4 de nuestra presentación.
Conclusiones. ELTMO no beneficia a los enfermos con un fenotipo severo si muestran evidencia de déficit mental. Considerando el riesgo elevado del TMO, los casos comprometidos discretamente no deberían ser transplantados. Los beneficios del tratamiento con reemplazo enzimático para los casosde SH con compromiso del SNC son inciertos y  deberán ser evaluados para estas situaciones.

BONE MARROW TRANSPLANTATION (BMT) IN HUNTER SYNDROME (HS).

Chamoles N. Fundación para el Estudio de las Enfermedades Neurometabólicas.

Few patients have been transplanted for HS with varying degree of success. We present the results of BMT performed in 4 patients from 3 families.

      PATIENTS               1                   2                  3                  4

      Age diagnosis          2 y               1 m              20 d           2 7/12 y

      Mutation             1246C>T     1246C>T      S132W     IDSG Inversion

      Age  BMT          7 10/12 y          3 y                3 y               3 y

      Follow  up          1 3/12 y        1 11/12 y          8 y             2 ½ y

In BMT patients the urinary glycosamynoglycans normalized earlier and the enzyme activity (serum and leukocytes) later. Mutant blood DNA was absent on the 3 cases studied after 1 ½ year of transplant  (Low level detection limit of the method: 1% ). All BMT patients showed some improvement in their somatic   abnormalities: liver size decreased, joint rigidities and respiratory infections decreased or disappeared.  The absence of CNS involvement of cases 1 and 2 after BMT would be related more with the natural evolution of the disorder in this family (mild mutation of the iduronate sulfatase gene) than with the BMT effect. The untreated case of this family died at the age 18 y without evidence of intellectual deterioration.
Patient 3 (brother of a case with severe MPS II) was mentally normal before the BMT. Despite    sustained engraftment, absence of the complications  of graft versus host disease, normal enzyme levels, reduced urinary excretion of glycosaminoglycans and physical improvement, the patient has continued to decline in his neurological and intelectual functions. The effect of the BMT did not avoid the CNS involvement. The same comments of the disorders of patient 3 apply for patient 4.
Conclusions. BMT is not benefitial for patients with a severe phenotype if there is evidence of mental deficit.
Considering the high risk of the BMT, mildly affected patients should probably not be transplated. The benefits of  the enzyme replacement treatment for the CNS involvement in HS remains uncertain:  MPS II patients must be tested for this problem.

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CORRELACIÓN ENTRE PARÁMETROS MOLECULARES Y EVALUACIÓN FÍSICA, COGNITIVA Y CONDUCTUAL EN MUJERES CON MUTACIÓN COMPLETA DEL GEN FMR1.

Chertkoff,L*;Torrado M.delV.*;Yancovsky,J*; Bin,Lº;Witis,E*;Pistoia,M°;Abraldes,K°.Servicios de Genética* y Clínicas Interdisciplinariasº. Hospital Garrahan. 

El síndrome de FRA-X es la causa más común de retardo mental (RM) heredado (ligada al X dominante) y está causado por una expansión anormal de una secuencia repetida (CGG)n del gen FMR1. Cuando esta secuencia supera las 200 repeticiones está hipermetilada, fenómeno asociado a ausencia de proteína.Los varones con mutación completa (MC) presentan RM y un fenotipo característico.Las mujeres con MC muestran un amplio espectro fenotípico, por variación de los patrones de inactivación del X.
Objetivos: evaluar la influencia del tamaño de la amplificación CGG (AMP) y la proporción del cromosoma X normal activo en leucocitos(AR) en el fenotipo de una población de mujeres afectadas, con el fin de obtener predictores moleculares del status intelectual a ser empleados en asesoramiento y pronòstico.
Pacientes y métodos: 24 mujeres con MC pertenecientes a 21 familias fueron evaluadas desde el aspecto físico,conductual y cognitivo. 19 familiares de primer grado (13 premutadas y 6 normales) fueron incluídas como controles en los tests cognitivos. Se aplicaron puntajes físicos(EF) y conductuales(EC).En la evalución cognitiva (CI) se usaron diferentes test de acuerdo a la edad.Estudios moleculares:se usó la técnica de Southern Blot. AMP fue estimada considerando el tamaño más pequeño de MC detectado.AR fue calculado usando la ecuación NA/(NA+NI).Análisis de datos:t-test,Origin5.0 y Kodak Digital Science ID).
Resultados: las mujeres con MC mostraron valores medios de CI total(CIT)(x=65.2+/-16.6), significativamente menores que sus controles intrafamiliares apareados (x=89.2+/-13.2)(n=19 pares,p<0.05).Resultados similares fueron obtenidos cuando se compararon el CI de ejecución (CIE) y el CI verbal (CIV).Fueron aplicados análisis de regresión linear para cada variable fenotípica(EF, EC, CIT, CIE y CIV) en las 24 mujeres con MC vs. las 2 medidas de FMR1 (AMP y AR)Se encontró una fuerte correlación negativa entre EF y AR (r=0.62, p=0.00158)pero no con las otras variables.Como AR mostraba una asociación linear con la edad(r=0.55,p=0.0069)estos mismos análisis fueron realizados en el grupo de niñas(n=19,x edad=7.56+/-33.72 años)con resultados similares.
Conclusión:se observó un efecto dominante de la mutación del gen FMR1 sobre los factores genéticos y medioambientales involucrados en el desarrollo mental de las mujeres con MC.La asociación de AR en sangre con los signos físicos(que involucran conectivo),pero no con los patrones intelectuales puede deberse a una inactivacion del X tejido específica.Se deberían buscar tejidos  de origen ectodérmico para su correlación con el CI (mucosa bucal o bulbo piloso) .

CORRELATION BETWEEN MOLECULAR PARAMETERS AND EVALUATION PHYSICAL,BEHAVIORAL AND COGNITIVE IN FEMALES WITH FMR1 GENE FULL MUTATION.

Chertkoff L, Torrado M,Yancovsky J; Bin L, Witis E; Pistoia M, Abraldes K. Dpt. of Genetics and Interdisciplinary Clinics. Hosp. de Pediatría Garrahan. Buenos Aires. Argentina.

The Fragile-X Síndrome(Fra-X) is the most frecuent cause of inherited mental retardation(MR),X dominant linked. It involves the abnormal expansion of (CGG)n trinucleotide repeat region of the FMR1 gene. When this is more than 200 CGG (full mutation,FM),the gene is usually methylated with subsequent absent of protein. Males with full mutation have a classic phenotype with mental retardation whereas FM females have a wide range of phenotypes from normal to MR because of the inactivation of one of the two Xs (lyonization).
Objectives: The aim of this study was to assess the influence of FMR1 gene full mutation size(AMP) and the proportion of normal activeX chromosomes in leukocytes(AR) on the wide range of physical, behavioral and cognitive features of females carrying a FM for counseling and prognosis.
Patient and Methods: Twenty-four females with FM belonging to 21 families were clinically,behavioral and cognitively evaluated.Nineteen first-degree relatives(13 premutated and 6 normal females) were included as controls in cognitive testing. Physical(PI) and Behavioral(BI)Index score were applied. Several cognitive measures were used according to age.DNA from lymphocytes was analyzed by StB12.3 Southern blot assay using EcoR1/EagI double digests. AMP was estimated considering the smallest FM detectable fragment size. AR was calculated using the equation NA/(NA+NI).Results: The females showed mean full-scale IQ (FSIQ) (x=65.2±16.6) signicantly lower than their paired controls (x=98.2±13.2) (n=19 pairs, P<0.05). Similar results were obtained when performance IQ (PIQ) and verbal IQ (VIQ) were compared. The linear regression analysis was performed for each phenotypical variable (PI, BI, FSIQ, PIQ and VIQ) assessed in the 24 FM females, versus the two relevant FMR1 measures (AMP and AR). A strong negative correlation was found between PI and AR (r=-0.62, P=0.00158) but not in the other categories. As AR showed a linear association with age (r=0.55, P=0.0069) the same analysis was performed taking the girls group (n=19, mean age=7.56±3.72yrs) with similar results. No significant correlation was found either when the difference between paired control IQ and FM female IQ was considered.
Conclusions: A dominant effect of FMR1 full mutation over genetic and environmental factors was observed in the mental development of FM females. The association of lymphocyte AR with physical characteristics but not with intellectual development may be due to specific tissue X inactivation .Tissúes of ectodermal origin may be better correlated with IQ.

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PRIMER ESTUDIO MOLECULAR EN LA ARGENTINA DE FAMILIAS CON ENFERMEDAD GRANULOMATOSA CRÓNICA (EGC).

Barese, C., Zhang, Y., Huang, K.; Copelli, S.; Rivas, E. M. and McCabe,E. Inmunología y CEDIE. Hospital de Niños “Ricardo Gutiérrez”. Buenos Aires. Argentina. Division of Genetics. Department of Pediatrics. Mattel Children’s Hospital at UCLA. USA.

Introducción: La EGC es un defecto primario de las células fagocíticas por el cual fallan en producir metabolitos intermediarios del O2 como el anión superóxido. Infecciones piógenas severas recurrentes es la manifestación clínica habitual. El defecto reside en una de las cuatro proteínas que componen el sistema de la oxidasa NADPH de las células fagocíticas. La forma de transmisión ligada al cromosoma X se produce por defectos del gen CYBB que localiza en Xp21.1 y codifica la glicoproteina de 91kD de la oxidasa. No se han realizado en Argentina estudios previos en pacientes con EGC de que permitan caracterizar esta enfermedad desde sus bases moleculares.
Objetivo: identificar mutaciones genéticas que expliquen la EGC de transmisión ligada al cromosoma X.
Metodología Se estudiaron cuatro pacientes varones, dos de ellos hermanos, pertenecientes a tres familias no-relacionadas y sus respectivas madres. El diagnóstico de EGC se realizó por clínica y resultados anormales de estudios funcionales (NBT y oxidación de dihydrorhodamine –DHR- por citometría de flujo). Dos madres mostraron resultados claramente patológicos y compatibles con portación de la enfermedad. En la otra madre el resultado estuvo en límite inferior de lo normal. Se purificó ADN genómico de pacientes y madres. Se amplificaron los 13 exones del gen CYBB por PCR. Se realizó análisis inicial de los productos de PCR por técnica de polimorfismo conformacional de cadena única (SSCP) y secuenciamiento automático de los exones sospechosos.
Resulados: Todos los pacientes presentaron mutaciones puntuales en el gen CYBB. Uno de ellos sustitución de C880T en el exon 8, Arg290 y un codon stop.En otro paciente se detectó mutación T997C que produjo una sustitución Cys329Arg en exon 9.Dos pacientes hermanos un cambio de base G712T en exon 7. SSCP de los exones con mutación en los pacientes se realizó en las respectivas madres. Un patrón anormal de bandas polimorficas se detectó, sugiriendo estado de portadoras.
Conclusiones: Las mutaciones detectadas en las tres familias son heterogéneas y no evidenciaron zonas calientes en el gen CYBB. El genotipo hallado podría ser responsable del defecto funcional de la NADPH oxidasa expresado por la anormalmente baja producción de anión superóxido en los pacientes estudiados y testeado por NBT y DHR. El SSCP puede ser informativo sobre todo cuando los estudios funcionales fracasan en definir a la madre como portadora. Sin embargo la confirmación por secuenciamiento de los exones sospechosos es insustituible.

FIRST MOLECULAR GENETICS STUDY OF THREE FAMILIES WITH CHRONIC GRANULOMATOUS DISEASE(CGD) IN ARGENTINA.

Barese, C.; Zhang, Y.; Huang, K.; Copelli, S.; Rivas E. M. and McCabe, E. “Ricardo Gutierrez” Children’s Hospital. Buenos Aires. Argentina. Division of Genetics. Department of Pediatrics. Mattel Children’s Hospital at UCLA. USA.

Background CGD is an uncommon primary disorder of phagocytic cells. Superoxide anion (O₂) production by leukocytes is absent or extremely low causing recurrent pyogenic infections in children. The molecular defect is in any of the four genes encoding for the proteins of the phagocytic NADPH-oxidase.The X-linked form is caused by mutations in the CYBB gene which localizes in Xp21.1. This gene encodes the 91-kD glycoprotein of the NADPH-oxidase which catalizes O₂^- production of phagocytic cells.None previous study was conducted in Argentina to further characterize this disease.
Objective: To perform the first molecular genetics analyses in patients of three X-linked CGD families of Argentina.
Methodology: Four male-CGD patients of three unrelated families and their mothers were studied. The patients were previously diagnosed with CGD by abnormal either NBT or oxidation of dihydrhodamine assay by flow cytometric analyses. Two mothers showed a mosaic pattern in this assay that is characteristic of carriers while the other presented a nearly normal result. Genomic DNA was isolated from patients and mothers. Amplification of the 13 exons of the CYBB gene by PCR and SSCP of the PCR products were performed. Sequencing analyses was carried out to either confirm the mutations in patients or to define carrier status in mothers.
Results: Two kindred presented single nucleotide substitution. The first one is a C880T in exon 8. The second kindred composed by two siblings is a G712T in exon 7. These nonsense mutations produced stop codons. The third kindred showed an aminoacid substitution Cys328Arg in exon 9. SSCP analyses of the mutated exons in the patients was carried out in their mothers. An abnormal band pattern of polymorphism was detected suggesting carrier status.
Conclusions: The mutations detected are heterogeneous and non hot spots for these mutations are recognized in the CYBB gene. Furthermore, the mutations detected in these patients are responsible for the functional defect of the phagocytic NADPH-oxidase. SSCP can be informative to detect carriers when functional assays are not clear enough. However, confirmation of carrier status by sequencing of the relevant exons in mothers are needed and  ongoing in our laboratory.

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EVOLUCIÓN DE LA POSICIÓN AL DORMIR EN LACTANTES

Eymann, A; Caprotta, G; Ricciardi, M. Departamento de Pediatría del Hospital Italiano de Buenos Aires

INTRODUCCION: Se ha demostrado que la posición al dormir es uno de los factores relacionados con el síndrome de muerte súbita del lactante(SMSL). Desde 1992 existe un consenso que recomienda el decúbito dorsal o lateral para dormir en lactantes sanos de 0 a 6 meses. Es conocida la dificultad que existe para modificar los hábitos y costumbres de la población general.
OBJETIVO: Conocer la evolución de la actitud de un grupo de padres con respecto a la posición al dormir de sus hijos en los últimos 5 años.
MATERIAL Y METODOS: Se trata de un estudio observacional descriptivo sobre la base e 300 encuestas, 100 en cada año (1996-1998-1999) a familias con bebés sanos entre 0 a 6 meses de edad que acudieron al vacunatorio del Hospital Italiano de Bs As de Lunes a Viernes de 8 a 17 hs. Las encuestas se realizaron durante los meses de primavera de los 3 años mencionados.
Se consideró como posición recomendada (PR) el decúbito dorsal y/o lateral y como posición no recomendada (PNR) decúbito ventral y/o indiferente.
RESULTADOS: La edad fue homogénea en las 3 muestras siendo la media de 3,1 meses. Los padres colocan a sus hijos en PR para dormir en un 49%, 69% y 91% en los años1996, 1998 y 1999 respectivamente. Analizando la recomendación del pediatra según la referencia de los padres se observa un aumento creciente de la PR a lo largo de los años, 56% (1996) 71%(1998) y 79%(1999). Además se observa una mayor concordancia entre la  indicación pediátrica (según referencia familiar) y la posición elegida para acostar al bebé. Examinando los motivos por los cuales eligen determinada posición se observa que el número de padres que asocian posición al dormir con menor riesgo de SMSL se triplicó con el paso de los años: 18% (1996) 24% (1998) 53% (1999). Entre aquellos padres cuyos hijos previos durmieron boca abajo se observó un cambio significativo en la elección actual de posición al dormir a favor de la PR: 42% en 1996 y 88% en 1999 (p< 0,05).
CONCLUSIONES: Se observa una evolución favorable de la actitud del grupo de padres estudiado con respecto a la posición al dormir de sus hijos entre los años 1996-1999. La misma se expresa en : 1) mayor número de bebés colocados en PR vinculados a un mayor conocimiento por parte de los padres de la asociación al dormir con SMSL.2) mayor correlación entre la posición elegida y la que refiere la familia que fue indicada por el pediatra. 3)mayor aceptación de la PR aún entre padres cuyos hijos anteriores durmieron boca abajo.

EVOLUTION OF THE SLEEP POSITION IN INFANT 

Eymann, A; Caprotta, G; Ricciardi, M.  Department of Pediatrics of the Italian Hospital of Buenos Aires 

INTRODUCTION: It has been demonstrated that the position when sleeping is one of the factors related with the sudden infant death syndrome(SMSL). From 1992 a consent that recommends the dorsal or lateral decubitus to sleep in healthy infants from 0 to 6 months exists. It is known the difficulty that it exists to modify the habits and the general population's customs. 
OBJECTIVE: To know the evolution of the attitude of a group of parents with regard to the position when sleeping of their children in the last 5 years. 
MATERIAL AND METHODS: It is a descriptive observational study on the base and 300 surveys, 100 in every year (1996-1998-1999) to families with healthy babies among 0 to 6 months of age that they went to the vaccination room of the Italian Hospital from Bs As of Monday to Friday from 8 to 17 hs. The surveys were carried out during the months of the 3 year-old spring. 
It was considered as recommended position (PR) the decubitus dorsal and/or lateral  and as not recommended position (PNR) decubitus ventral and/or indifferent. 
RESULTS: The age was homogeneous in the 3 samples being the stocking of 3,1 months. The parents place their children in PR to sleep in 49%, 69% and 91% in the years1996, 1998 and 1999 respectively. Analyzing the pediatrician's recommendation according to the reference of the parents a growing increase of the PR is observed along the years, 56% (1996) 71%(1998) and 79%(1999). a bigger agreement is also observed among the pediatric indication (according to family reference) and the elected position to put to bed the baby. Examining the reasons for which choose certain position is observed that the number of parents that they associate position when sleeping with smaller risk of SMSL tripled with the step of the years: 18% (1996) 24% (1998) 53% (1999). among those parents whose previous children slept a significant change face down it was observed in the current election of position when sleeping in favor of the PR: 42% in 1996 and 88% in 1999 (p <0,05). 
CONCLUSIONS: A favorable evolution of the attitude of the group of parents is observed studied with regard to the position when sleeping of its children among the years 1996-1999. The same one is expressed in: 1) bigger number of babies placed in PR linked to a bigger knowledge on the part of the parents from the association when sleeping with SMSL.2) bigger correlation among the elected position and the familiy refers that was indicated by the pediatrician. 3)mayor acceptance of the PR still among parents whose previous children slept face down. 

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OBESIDAD INFANTIL: PREVALENCIA DE ALTERACIONES DEL METABOLISMO DE LOS HIDRATOS DE CARBONO  

Krochik AG; Ozuna BA; Araujo MB; Mazza CS. Servicio de Nutrición. Hospital Nacional de Pediatría J.P.Garrahan. Buenos Aires. Argentina.

Existe creciente evidencia de que la prevalencia de diabetes 2 en niños y adolescentes se ha incrementado. Una explicación posible es el aumento de la prevalencia de obesidad, que ha tomado proporciones epidémicas en el mundo. Nuestro objetivo  fue evaluar la prevalencia de resistencia a la insulina, alteración de la secresión insulínica y diabetes 2 en niños y adolescentes obesos.
METODOLOGIA: Se estudiaron 498 pacientes obesos asintomáticos, definiéndose como obesidad a un IMC igual o mayor al pc 85 para sexo y edad. La intolerancia a la glucosa y la diabetes se diagnosticaron de acuerdo a los criterios de la ADA. Los índices de insuino resistencia y función de célula b fueron calculados a través de una prueba de tolerancia oral a la glucosa, utilizando el modelo de homeostasis (HOMA), el índice de resistencia insulínica (HOMAIR), el índice de función de célula b (HOMA b cell), el índice insulin/glucosa (AUCI/AUCG), la insulina plasmática en ayunas (FPI) y el índice de sensibilidad insulínica (ISI Composite)
RESULTADOS: Se encontraron 44 pacientes con intolerancia a la glucosa (8.8%) y 7 con diabetes 2 (1.4%). Los mismos no presentaron diferencias significativas en la edad y el IMC.

CONCLUSIONES: Los índices de resistencia isulínica HOMAIR, AUCI y FPI se incrementaron, mientras que los de secresión de célula b  HOMA b cell e ISI declinaron con el empeoramiento de la tolerancia a la glucosa. En los niños con obesidad, debería ser estudiada la tolerancia a la glucosa para una intervención terapéutica apropiada.

OBESITY IN CHILDHOOD: PREVALENCE OF GLUCOSE METABOLIC DESORDERS 
Krochik AG; Ozuna BA; Araujo MB; Mazza CS. Servicio de Nutrición. Hospital Nacional de Pediatría J.P.Garrahan. Buenos Aires. Argentina.

Evidence is accumulating suggesting that the prevalence of type 2 diabetes is increasing in children and adolescents. One possible explanation for this is the increase in obesity, reaching epidemic proportion in the world. The aim of this study was to evaluate the prevalence of type 2 diabetes, impaired glucose tolerance (IGT), insulin resistance and insulin secretion in obese children and adolscents.
METODOLOGIC: We studied 498 asyntomatic obese patients. Obesity was defined as a BMI greater or equal to the 85^th percentile by age and sex. Diabetes and IGT were diagnosed according to new ADA criteria. Insulin resistance indices and beta cells function were assessed from oral glucose tolerance test (OGTT) by using the homeostasis model assessment (HOMA), the insulin resistance index (HOMAIR), the plasmatic b cell function (HOMA b cell), the insulin/glucose index (AUCI/AUCG), the fasting plasma insulin (FPI) and insulin sensitive index (ISI composite).

RESULTS: We found 44 patients with IGT (8.8%) and 7 with type 2 diabetes (1.4%). The mean age and BMI hasn´t significance differences between the groups.

CONCLUSION: These results suggest that insulin resistance increases and insulin secretion worsened when the glucose tolerance declines. Children with obesity should undergo testing glucose tolerance for apprpriated therapeutic intervention.

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EXPERIENCIA CON LACTANCIA MATERNA EN NIÑOS FENILCETONURICOS (PKU)

Chiesa A, Keselman A, Fraga C, Prieto L, Pardo ML, Gruñeiro de Papendieck L.  Fundación de Endocrinología Infantil (FEI). Buenos Aires. República Argentina.

Introducción : La fenilcetonuria, de acuerdo a los hallazgos de nuestro programa de pesquisa neonatal, afecta  en nuestro país a 1:15678 recién nacidos. La alimentación materna puede ser una técnica eficaz en el manejo dietético de estos pacientes, especialmente en países en los que la lactancia es recomendada por los pediatras, con objetivos nutricionales y de prevención infectológica.
Objetivo: Comunicar la experiencia de tratamiento de pacientes PKU conservando la lactancia materna .
Material y métodos: Se comunican los datos retrospectivos de 22 niños PKU con adecuado seguimiento y control metabólico. En 12 (G1) el diagnóstico fue confirmado a una edad media de 24 días. Fueron alimentados con leche materna y  Analog XPâ de acuerdo a las recomendaciones de Greeve y col  hasta su destete a una edad media de 6.5 meses. Los otros 10 niños PKU  (G2) suspendieron la lactancia después de la confirmación diagnóstica (29 días) y recibieron productos libres de fenilalanina y fórmulas con cantidades conocidas de la misma. El tiempo de control metabólico (fenilalanina en sangre <7mg/dl), talla, peso, y perímetro cefálico se compararon en ambos grupos hasta la edad de dos años, y hasta los 4 años en 6 pacientes del  G1 y 8 del G2. En los mismos individuos se compararon los coeficientes de desarrollo (CD) valorados con el test de Gessell hasta la edad de 3 años y coeficientes intelectuales a los 4 años de edad valorados con el  test de WIPSI. El análisis estadístico se realizó mediante la prueba no paramétrica de Mann Whitney para grupos independientes.
Resultados: No hubieron diferencias significativas en las variables estudiadas en los dos grupos . Los CD a los 0.5, 1 , 2 y 3 años  y el CI a los 4 fueron: G1:100±8, 102±7 ,100±10,104±9 y 110±9 ; G2: 100±7, 101±11, 97±8, 98±6 y 104±14 sin diferencias entre ambos grupos. Mantener la lactancia requirió  un mayor esfuerzo del equipo tratante  para contener a la madre al comienzo del tratamiento  pero  permitió a la familia afectada  elaborar con más tiempo la llegada de un niño PKU, mejorando el vinculo madre-hijo
Conclusión: La lactancia materna constituye una herramienta útil en el tratamiento de niños PKU en nuestro país, siendo segura, económica y eficiente para lograr el adecuado control metabólico y crecimiento normal de estos niños, mejorando la calidad de vida de estas familias.

EXPERIENCE WITH BREASTFEEDING IN PHENYLKETONURIC BABIES(PKU)

Chiesa, A, Keselman A, Fraga C, Prieto L, Pardo ML, Gruñeiro de Papendieck L.  Fundación de Endocrinología Infantil (FEI). Buenos Aires. República Argentina.

Introduction Breastfeeding can be a successful technique to manage PKU infants, especially in those countries where mothers are encouraged to breastfeed in order to prevent infectious diseases. Objective: To show our experience with breastfeeding in comparison to artificial lactation in PKU babies.
Subjects and methods: Phenylketonuria, according to the  findings of our neonatal screening program has in our country an incidence of 1:15678 newborn. Retrospective data are shown from 22 PKU babies with adequate metabolic control. In 12 (G1) diagnosis was confirmed at a mean age of 24 days. They were treated with breastfeeding and Analog XP â according to Greeve et al guidelines till their weaning at a mean age of 6.5 months. The other 10 PKU children (G2) were weaned after diagnosis (29 days) and received phenylalanine free products and formula with known amounts of phe. Time of achievement of metabolic control (phe < 480 mmol/l), height, weight and head circumference (HC) were compared till age 2 in both groups and till age 4 in 6 patients of G1 and 8 of G2. Maturation scores (CD) obtained with  Gessell test were compared till age 3 and WIPSI scale (IQ) at age 4. Statistical analysis was performed with Mann Whitney U non parametric test.
Results: There were no significant differences between breastfed an bottle-fed babies in the studied variables. CD at 0.5, 1 , 2 and 3 years of age  and IQ at four  were: G1:100±8, 102±7 ,100±10,104±9 and 110±9 ; G2: 100±7, 101±11, 97±8, 98±6 and 104±14 without differences between groups. Breastfeeding required more effort in the professional team to support the mother early in lactation giving the family more time to elaborate the arrival of a PKU baby with a better bonding. Conclusion: Breastfeeding was a useful technique in PKU management in our country, being safe, economic and efficient for the good control and normal growth and development of these children, improving these families¢ quality of life.